生物安全柜內(nèi)如何科學(xué)分區(qū)擺放工具
 

1 概述
 

　　今天的文章和大家分享生物安全柜(以下簡稱BSC)操作使用上的注意事項(xiàng)，包括：如何開關(guān)、工具如何分區(qū)擺放、運(yùn)行時(shí)如何避免污染。
 

　　BSC是一種半密閉的通風(fēng)設(shè)備，它為實(shí)驗(yàn)操作者提供潔凈空氣，并且潔凈空氣按特定方向持續(xù)吹出。
 

　　BSC內(nèi)提供了一個(gè)供操作者擺放實(shí)驗(yàn)工具和操作的臺面，當(dāng)設(shè)備運(yùn)行時(shí)，臺面內(nèi)的空間會(huì)持續(xù)獲得經(jīng)過過濾的潔凈空氣；設(shè)備不運(yùn)行時(shí)，可關(guān)閉臺面的玻璃門，并執(zhí)行紫外照射消毒。
 

　　2 分類
 

　　BSC根據(jù)防護(hù)等級可以分為I、II和III三種等級。
 

　　I級保護(hù)樣品無菌，但不保護(hù)人員和環(huán)境，適用于低至中等風(fēng)險(xiǎn)的實(shí)驗(yàn)操作；
 

　　II級(A1/A2/B1/B2型)同時(shí)保護(hù)人員、樣品和環(huán)境，適用中等至高風(fēng)險(xiǎn)操作，如病原體培養(yǎng)，其中A2和B型可處理揮發(fā)性有毒物質(zhì)；
 

　　III級為全密閉，最高防護(hù)級別，用于高危病原體(如埃博拉病毒)。
 

　　如果我們的課題研究不涉及高風(fēng)險(xiǎn)病原微生物，那么細(xì)胞房內(nèi)一般配備的是II級BSC。
 

　　從下方的II級BSC工作原理圖可見，細(xì)胞房內(nèi)的空氣經(jīng)過操作臺面前端的氣孔被吸入BSC內(nèi)，經(jīng)過內(nèi)部管道流通后，到達(dá)操作臺面上方的HEPA濾膜。經(jīng)濾膜過濾后的空氣從上至下吹送至操作臺面。這些吹向臺面的潔凈空氣，當(dāng)吹過樣品和工具之后就不再潔凈了，它們會(huì)再次被臺面前端的氣孔回收進(jìn)入二次循環(huán)。這樣，就確保了不潔凈的空氣不會(huì)吹出臺面進(jìn)而污染操作者和環(huán)境。
 

　　所以說，II級BSC能保護(hù)樣品也能保護(hù)人員和環(huán)境。
 

　　3 如何開關(guān)
 

　　在每一次實(shí)驗(yàn)操作之前，應(yīng)該先擦拭干凈臺面，把稍后操作要用的工具按一定規(guī)則擺放好，然后關(guān)上玻璃門，設(shè)置紫外照射30分鐘，此時(shí)，人應(yīng)遠(yuǎn)離BSC等待消毒結(jié)束。
 

　　消毒結(jié)束后，關(guān)閉紫外，拉起玻璃門至適當(dāng)高度(通常設(shè)備會(huì)有提示限高位置，超出后無法打開風(fēng)機(jī)或報(bào)警)，然后開燈和打開風(fēng)機(jī)。等待內(nèi)部氣流穩(wěn)定5-10分鐘后，人再坐下來操作。
 

　　實(shí)驗(yàn)操作結(jié)束后，清潔臺面，此時(shí)仍然應(yīng)該讓風(fēng)機(jī)繼續(xù)運(yùn)行5-10分鐘，目的是把內(nèi)部空氣完成過濾。
 

　　4 如何擺放操作臺面呈矩形，工具擺放時(shí)應(yīng)遵循科學(xué)分區(qū)原則：1 將臺面分為潔凈區(qū)、操作區(qū)和污染區(qū)；2 操作區(qū)在中間位置，潔凈區(qū)和污染區(qū)不相鄰；3 工具應(yīng)盡量均勻展開，彼此不遮擋。潔凈區(qū)應(yīng)擺放樣品和一次性耗材，例如吸頭、移液管、離心管、培養(yǎng)瓶皿。
 

　　操作區(qū)是實(shí)驗(yàn)操作的區(qū)域，中間位置盡量留空，靠內(nèi)側(cè)的位置可擺放移液器、試劑瓶。
 

　　污染區(qū)是存放廢棄物的地方，可以把廢液缸、垃圾桶放在這里，但應(yīng)盡量靠內(nèi)側(cè)、靠遠(yuǎn)端放置(應(yīng)確保與它們距離最近的瓶皿、設(shè)備至少相隔30厘米或以上)。
 

　　5 使用注意事項(xiàng)首先，正式操作時(shí)，操作者的手會(huì)多次伸入臺面，并在里面移動(dòng)。我們應(yīng)注意：1 手臂應(yīng)與臺面呈垂直方向伸入；2 在內(nèi)部左右移動(dòng)時(shí)速度不要過快(見下圖)。這樣可以盡量降低手臂移動(dòng)對垂直氣流帶來的擾動(dòng)。
 

　　其次，臺面上的工具會(huì)被拿來拿去，要切記：1 工具用完后不要放錯(cuò)區(qū)域；2 工具擺放的位置絕對不能擋住進(jìn)氣孔。
 

　　第二點(diǎn)的原因是避免工具擋住進(jìn)氣孔，造成污染的空氣無法被回收，從而釋放到實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，同時(shí)也會(huì)造成外部污染的空氣進(jìn)入BSC時(shí)不能全部被吸入進(jìn)氣孔，造成污染臺面。
 

　　最后，是盡量避免樣品、試劑被氣流長時(shí)間對著直接吹。這一點(diǎn)可能有點(diǎn)難理解，我們舉例說明。
 

　　例如，培養(yǎng)皿的蓋子打開后，手應(yīng)該拿著蓋子擋住上方的氣流，而不是直接讓皿內(nèi)的培養(yǎng)物被氣流持續(xù)吹著。一方面是防止空氣污染(雖然可能性很小)，另一方面是避免強(qiáng)大的氣流把培養(yǎng)物內(nèi)可能存在的污染吹出來。同理，試劑瓶也是如此。
 

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